◎ 细胞及组织蛋白质抽提; ◎ 蛋白质定量; ◎ 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE); ◎ 蛋白质转膜; ◎ 膜的封闭; ◎ 一抗、二抗孵育; ◎ 结果检测:化学发光法检测,X 胶片曝光显影; ◎ 数据分析 1. 客户需自备一抗,本公司可代为购买一抗。 2. 标本尽可能新鲜;标本量:组织块大于100mg;细胞大于6×106。 3. 技术部将在收到标本后20-30个工作日之内提交实验结果,实验结果以数据和图片的形式提交给客户。 标本收集及注意事项: 对于组织样品: 采集新鲜组织,离体时间尽量不超过15分钟,用锡箔纸包埋或者放入冻存管中,先放入液氮中速冻几个小时或者过夜,再放入-80度冰箱或液氮保存。 细胞样品: 1、贴壁细胞:取大约1*107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体,加入适量的PBS悬浮细胞,转入离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入液氮中速冻,然后转入-80度冰箱保存。 2、悬浮细胞:离心收集细胞,弃去培养液,加入适量PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入液氮中速冻,然后转入-80度冰箱保存。 结果展示: |