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UMI-RNAseq

产品介绍:

UMIUnique molecularidentifier)——特异性分子标签(UMI)为 8-10nt 的短序列,可看做“条形码”,在文库构建时通过连接接头引入UMI标签连接到cDNA分子中,标记原始样品中的每个分子,对同一来源扩增产物进行追踪和最终提取分组,用于排除 PCR 扩增偏好性和测序偏好性引入的定量偏差,便于获得足够的读数以进行分析。

UMI-RNA-seq技术是利用高通量测序技术在文库构建时引入特异性分子标签UMI,全面快速地获取某一物种特定器官或组织在某一状态下的几乎所有转录本,实现精准定量,更准确识别SNP位点(Single Nucleotide Polymorphisms),准确定量低丰度转录本,提供全面的转录组信息

可开展真核有参转录组,真核无参转录组及原核转录组等方向研究,全面助力基因表达水平研究。


原理及优势:

图片51.png

基因表达定量更准确

UMI技术无需跟踪拷贝数,可达到区分来自单个分子冗余的PCR重复序列,减少重复定量,屏蔽PCR偏好性,矫正测序错误,以达到绝对定量;

低丰度转录本准确定量

相同UMI标记的reads可进行相互矫正,对于测定的reads均会保留,而不会被当作背景噪音剔除,相比常规建库方式得到的有效数据量增多,可将部分低丰度转录本准确鉴定到;

获得的位点突变SNP更为准确

UMI技术降低了文库构建过程中的扩增及测序错误引入的假阳性,在进行SNPIndel的分析中获得的信息更为准确;

差异基因与qPCR验证一致性更高

通过UMI技术可实现精准定量,进而对于差异基因进行qPCR验证结果的一致性要明显高于普通转录组;

起始量低

对于UMI技术的建库起始RNA量低至200ng

技术流程及送样要求:

参见转录组测序流程及要求