KAPA 3G植物直接PCR试剂盒1、产品性能 2、反应 1.纯化DNA或抑制因子少的样本,反应体系可适当减少,最少可减至10μl。困难模板推荐使用50μl体系; 2.直接扩增叶片种子等,需要提高MgCl2浓度; 3.部分反应50μl体系需要加入的酶量大于1unit,对于非常复杂的模板,酶的用量可增大到5units/50μl。 重要提示: (1)确保试剂使用之前完全溶解,开盖之前请稍微离心,KAPA Plant PCR Buffer是粘稠的,因此需要先在反应体系中加入水,然后再加入KAPA Plant PCR Buffer,所有试剂加入完毕之后,用枪头吹打几次混匀; (2)KAPA Plant PCR Buffer(2 x)稀释成1 x之后,含有1.5mM MgCl2,本试剂盒单独提供MgCl2(25mM)。扩增纯化DNA,浓度1.5mM足够了,但若直接扩增植物组织,需2.05mM MgCl2; (3)KAPA Plant PCR Enhancer(100 x),反应终浓度0.2-1.0x (1.0-0.5μL/50μL),主要用于复杂模板,无需额外提高以优化好的MgCl2和酶的浓度。 (4)以下情况需要使用试剂盒配备的稀释Buffer;①直接扩增不成功;②一个模板多次扩增,(尤其是植物组织数量有限)③储存模板样本,为了随后的PCR反应,稀释Buffer成份【pH值8.0-8.5的50mM Tris-HCI, 0.1mM EDTA,0.2 x KAPA Plant PCR Enhancer】 2)反应参数 3)疑难问题与解答 3、产品信息
文章分类:
KAPA直接扩增、DNA快速提取
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