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外泌体提取试剂盒(EIQ3)


  外泌体(Exosome)是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的直径30-150nm的纳米级脂质包裹体结构,密度1.13-1.21g/ml,内部包裹了蛋白质、mRNA和microRNA等物质,天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳等。越来越多的证据表明,对外泌体的分析和检测可以辅助疾病的早期诊断、疗效评价和预后分析。


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获得高纯度的大量外泌体样本是开展外泌体研究的基础,也是保障研究结果准确性的前提。经典的超速离心法(差速离心)、密度梯度离心法、免疫磁珠法、超滤法在外泌体制备过程中经常受到大型仪器设备的资源限制,并且存在操作复杂、耗时、外泌体量少、纯度低、价格高等缺陷。因此,试剂盒法逐渐成为外泌体提取方法中的主流技术,可帮助绝大多数科研人员获得高质量外泌体。


  自主研发的Exosome Isolation Q3(简称EIQ3)系列外泌体提取剂盒,不仅有效提高外泌体得率,同时能够显著减少杂蛋白残留(如血清高丰度蛋白)。该试剂盒可以实现血清、血浆、尿液、细胞上清等液质样本中外泌体的快速提取,为后期外泌体研究的数据稳定性和可靠性提供保障。


货号                   产品名称                               规格                 说明
EIQ3-01001
     血清外泌体提取试剂盒           150 rxns          以200μL 血清样本为一次反应
EIQ3-02001     血浆外泌体提取试剂盒           150 rxns          以200μL 血浆样本为一次反应
EIQ3-03001      尿液外泌体提取试剂盒           10 rxns            以10mL 尿液样本为一次反应
EIQ3-04001     细胞上清外泌体提取试剂盒    10 rxns            以10mL 细胞上清样本为一次反应

                                              点击货号下载试剂盒操作说明书


一、外泌体试剂盒特点

  • 外泌体纯度高(Quality)  

  • 外泌体得率高(Quantity)

  • 操作简便,周期短(Quick)

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二、外泌体试剂盒实用效果展示


       应用华盈生物EIQ3系列外泌体提取试剂盒提取的外泌体,可用于不同的外泌体鉴定实验,包括电镜观察,Nanosight分析,Western Blot鉴定外泌体marker等。以下实测结果以血清/尿液外泌体提取数据为例进行展示和分析:



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       Nanosight对华盈生物EIQ3-01001试剂盒三次平行实验富集的血清外泌体进行浓度和粒径检测,显示出良好的重复性,粒径均一,平均粒径为127.4nm,外泌体数量级达到1011/ml。



华盈生物EIQ3外泌体试剂盒实用效果展示.png



   


      电镜结果显示,华盈生物EIQ3系列试剂盒在血清和尿液中富集的外泌体,其数量和结构均较好,外泌体呈囊泡状(经典茶托结构),粒径大小约为30-150nm。



试剂盒比较.png



       与国外同类型试剂盒相比,华盈生物EIQ3-01001试剂盒富集的血清外泌体,其数量与总蛋白量比值最高,提示EIQ3-01001富集的血清外泌体纯度更高,更有助于外泌体蛋白组的检测与分析。


血清外泌体marker&高丰度蛋白比较.png




       Western  Blot对EIQ3-01001富集的血清外泌体特定marker进行鉴定,可见条带清晰锐利。特别重要的是,EIQ3-01001对于血清高丰度蛋白Albumin和IgG(L)有更显著去除作用,更适合下游蛋白组学检测分析。

三、EIQ3试剂盒   VS   其他方法



提取方法比较.png



四、外泌体试剂盒使用方法


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外泌体提取相关FAQ


1)使用华盈生物外泌体提取试剂盒耗时多久?
以血清外泌体提取为例,样本预处理后,仅需要90分钟即可完成外泌体的收集工作。不同样本的外泌体提取试剂盒稍有差异,具体请参考说明书。  


2)一次反应能提取多少外泌体?
外泌体提取数量与样品类型相关。相同类型样本,如细胞上清样本,由于细胞类型的差异或者处理的差异,对提取的外泌体数量都有很大的影响。应用华盈生物外泌体提取试剂盒,200μl血清样本收集的外泌体蛋白量约为500μg(BCA法检测),对应的外泌体数量级可达在10
11(NTA检测)。  

3)提取的外泌体保存条件是怎样的?
建议将提取好的外泌体分装后保存在-80℃,避免反复冻融。
 

4)外泌体的蛋白组学提供分析吗?
不管是通过质谱还是芯片技术进行的外泌体蛋白组学研究,我们均可提供进一步的生物信息学分析。如GO分析、Pathway分析、聚类分析、IPA高级分析、个性化分析等。  

5)是否提供外泌体提取、鉴定、分析等一系列的服务?
华盈生物根据主流外泌体研究策略,开发了一套完整的外泌体蛋白质组学研究技术服务体系。提供从外泌体收集、鉴定到蛋白质组定性定量、数据分析一系列的技术服务项目,确保外泌体研究在同样技术标准下获得高质量研究数据。


相关文献

  1. Ander Arbelaiz, et al. Serum extracellular vesicles contain protein biomarkers for primary sclerosing cholangitis and cholangiocarcinoma. Hepatology. 2017.

  2. Chen I H, et al. Phosphoproteins in extracellular vesicles as candidate markers for breast cancer.Proc Natl Acad Sci USA, 2017.

  3. Haraszti R A, et al. High-resolution proteomic and lipidomic analysis of exosomes and microvesicles from different cell sources. J Extracell Vesicles, 2016.

  4. Hurwitz S N, et al. Proteomic profiling of NCI-60 extracellular vesicles uncovers common protein cargo and cancer type-specific biomarkers. Oncotarget, 2016.

  5. Clark D J, et al. Redefining the breast cancer exosome proteome by tandem mass tag quantitative proteomics and multivariate cluster analysis. Anal Chem, 2015.

  6. Hoshino A, et al. Tumour exosome integrins determine organotropic metastasis. Nature, 2015.